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條件平台

紅外雙色激光成像係統

儀器型號:LI-COR Odyssey
       美國LI-COR公司的Odyssey雙色紅外熒光成像係統利用其專利的紅外染料技術,兩個獨立的紅外熒光通道檢測熒光信號。該係統具有685nm和785nm激發波長的兩個獨立的紅外激光器,分別激發兩種紅外熒光染料,產生720nm和820nm的發射光,然後由兩個高靈敏度雪崩式光電二極管檢測器同時檢測熒光信號。

一般的熒光染料不能有效地用於檢測膜上的蛋白或者塑料培養皿中的蛋白,因為它們的激發和檢測波長位於可見光譜區,易形成膜(NC膜、PVDF膜、尼龍膜)的高背景熒光幹擾。而在紅外波長區檢測熒光信號,具有背景低,信噪比高的特點。因此,Odyssey可以用於檢測膜上和微孔板上的蛋白或核酸,並對其進行精確的定量分析。
Odyssey成像原理 
 
直接成像:使用紅外熒光染料標記的二抗,二抗孵育完成後,直接掃描成像;而ECL的方法,使用酶(HRP或AP)標記的二抗,孵育後,還必須加酶的反應底物進行酶動力學反應,再曝光成像或壓片。
1. 檢測的信號強度和結合的二抗數量具有線性關係,保證定量的準確性
2. 直接檢測,無需加酶底物,非酶動力學反應
3. 線性範圍寬,高豐度和低豐度的蛋白能同時得到清晰、銳利的圖像
4. 靈敏度和化學發光的方法相當
Odyssey的特點
直接檢測,操作簡單:雜交以後直接掃描成像,無需膠片、暗房或複雜的染色及顯色過程。        
雙色成像:兩種不同波長的紅外染料對生物分子(蛋白或核酸)標記和同時檢測。雙色輸出。兩個靶分子同時檢測,減少了工作量,而且雜交條件均等,便於兩個數據的對比,可進行準確的量化分析。
高靈敏度:對於Western blots檢測,靈敏度可達皮克級(pg)。
極寬的線性範圍:在紅外熒光區域,背景熒光信號大大低於可見熒光區域,因此,直接紅外檢測具有更寬的線性範圍,可以得到清晰的、銳利的條帶,一次雜交中的強信號和弱信號都可以清晰成像,從而提高了實驗重複性和定量精確性。
實驗成本低:Western成本低於常規化學發光,因為無需膠片和反應底物,而且二抗可重複使用進一步降低實驗成本。
功能強大的軟件係統:提供數據管理、定位蛋白大小和定量分析等完整功能
 
Odyssey的主要應用
雙色Western blots分析:蛋白的研究不僅有量化的要求,修飾性研究是很重要的一塊。Odyssey的雙色功能極大方便了蛋白表達豐度和修飾化蛋白的研究。
雙色 EMSA(電泳遷移率變化分析):Odyssey 可以直接在凝膠上進行兩個啟動子的分析,不需要印跡到膜上,方便、快捷、無放射性危險。
微孔板In-Cell Western分析:Odyssey可以直接在96或384孔板對細胞內目標蛋白進行精確定量,是高通量信號傳導通路分析和藥物篩選的最佳選擇。
組織切片掃描分析